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 分類: 轉(zhuǎn)錄組測序

在生物學(xué)的研究中,有一個常用的方法,就是通過比較分析獲取有用的信息和知識。我們現(xiàn)在最常見的比對是蛋白質(zhì)序列之間或核酸序列之間的兩兩比對,通過比較兩個序列之間的相似區(qū)域和保守性位點,尋找二者可能的分子進(jìn)化關(guān)系。我們在進(jìn)行功能注釋的時候也是基于序列相似 ? ? 功能相似這樣的一個原理來進(jìn)行的。

目前BLAST (Basic Local Alignment Search Tool)是現(xiàn)在應(yīng)用最廣泛的序列相似性搜索工具,它運用某種特定的數(shù)學(xué)模型或算法,找出兩個或者是多個序列之間的最大匹配堿基或氨基酸殘基數(shù),比對的結(jié)果反映了算法在多大程度上提供序列之間的相似性關(guān)系及它們的生物學(xué)特征。BLAST因其快速及比對精度高而被廣泛應(yīng)用于雙序列或多序列比對。

大家非常熟悉的是NCBI上面的BLAST比對,還記得小編讀研期間在師兄的諄諄教誨下學(xué)到的第一個技能就是BLAST比對,可見它的重要性及廣譜性!因為大家對NCBI上的BLAST非常熟悉,這里我就不做過多的介紹了。今天跟大家分享的是一款可視化的比對工具:百邁客云(BMKCloud)—BLAST。

序列比對與NCBI采用的都是第三方BLAST,其數(shù)學(xué)模型或算法都是一樣的??赡艽蠹乙獑柫?,既然都一樣,那我為什么要選擇BMKCloud呢?在這里我要隆重介紹介紹,BMKCloud優(yōu)勢如下:

1、更靈活:可以拿任何fasta文件當(dāng)做比對的數(shù)據(jù)庫,而NCBI是不支持自定義比對數(shù)據(jù)庫的,只能用內(nèi)置的數(shù)據(jù)庫做比對;

2、無限制:我們可以比對很多的序列,而NCBI上是有限制的,超過上限將不能運行比對任務(wù)。

很多時候我們拿到轉(zhuǎn)錄組的測序數(shù)據(jù),需要在海量的數(shù)據(jù)里找到自己關(guān)注的基因。我們可以通過關(guān)鍵詞進(jìn)行功能注釋的搜索,還有常見的方法是我們關(guān)注的 基因,可能在別的物種或者是近緣物種已有報導(dǎo)。針對這種情況我們就可以通過已知的基因序列運用BLAST比對在我們的測序數(shù)據(jù)里找同源序列。

那這個時候你需要的是什么?

大聲告訴我~~

對,就是百邁客云(BMKCloud)小工具—BLAST!

依然是非常簡單的操作步驟:

1.登錄百邁客云首頁(www.biocloud.net)——分析——工具

2.在對話框中輸入“BLAST”,Enter鍵進(jìn)入工具使用界面

3. 這里有幾個輸入框或勾選框,主要包括:

1、 項目名稱
2、database :用于建庫的核苷酸或氨基酸序列文件,默認(rèn)使用NR庫(FASTA格式)。
3、 infile :用于比對的序列文件,可以為核酸序列或者氨基酸序列。
4、 expect :非負(fù)數(shù),默認(rèn)的e值為10,E值越小,說明比對結(jié)果越可信。一般做基因的注釋,與已知數(shù)據(jù)進(jìn)行同源性搜索,通常設(shè)定為1e-5或 更小的值。
5、 qcov :0-100,默認(rèn)為80,查詢序列與目標(biāo)序列的覆蓋率。

其中兩個必填輸入框

項目名稱:即根據(jù)自己需求對本次BLAST進(jìn)行命名描述,以便于后期查看結(jié)果與
infile :在輸入比對的序列文件時,有三種方式,包括選擇云文件、瀏覽本地文件或拖拽文件

另外,之前提到BMKCloud很重要的一個優(yōu)勢在于可以拿任何fasta文件當(dāng)做比對的數(shù)據(jù)庫,因此在“database”這一輸入框中大家就可以選擇自己的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)作為比對的參考數(shù)據(jù)庫。

4.完成項目名稱和fasta文件輸入之后,點擊提交即可運行比對任務(wù)。

BMKCloud還有很多既操作簡單又實用的小工具,如果你正對著一組數(shù)據(jù)苦惱的話,那就來BMKCloud了解一下吧,可能會有很多驚喜發(fā)現(xiàn)??!

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