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 分類: 微生物組測(cè)序

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背景

1835年,著名生物學(xué)家達(dá)爾文乘坐英國(guó)皇家海軍“貝格爾”號(hào)來(lái)到了加拉帕戈斯群島,這是一個(gè)位于太平洋赤道附近的群島,每一個(gè)島嶼上的生物都與眾不同,達(dá)爾文收集了島上的鳥類標(biāo)本后驚奇地發(fā)現(xiàn),它們的多樣化簡(jiǎn)直讓人不可思議,而這些不起眼的小鳥也為達(dá)爾文的“物種起源”和“生物進(jìn)化”猜想奠定了重要基礎(chǔ)。

達(dá)爾文雀(Darwin’sfinches),原產(chǎn)于加拉帕戈斯群島的19種雀形目鳥類,由于生態(tài)地域隔離、特異喙結(jié)構(gòu)以及攝食習(xí)性(種子、蟲子及血液)差異,導(dǎo)致他們形成了“適應(yīng)輻射”(adaptive radiation)。盡管人們對(duì)這些標(biāo)志性鳥類進(jìn)行過(guò)調(diào)查,但它們的腸道菌群結(jié)構(gòu)及影響菌群結(jié)構(gòu)的因素尚未被探索。本文作者從達(dá)爾文雀的種類差異、生態(tài)地理位置以及攝食習(xí)性3方面進(jìn)行調(diào)查,研究成果于2018年發(fā)表在國(guó)際微生物TOP期刊Microbiome,該期刊的近五年影響因子為10.9分。

研究方法

采樣:9個(gè)地緣隔離島,12種達(dá)爾文雀,114個(gè)糞便樣本,2個(gè)季度(旱季+雨季)。

微生物多樣性:16S rRNA V4(515F/806R),IlluminaPE 250。

影響因素:季度、島、食性和雀種類。

鳥類食性:羽毛蛋白質(zhì)同位素標(biāo)記(δ13C、δ15N和δ34S)。

圖1.?加拉帕戈斯群島達(dá)爾文雀腸道微生物樣本采集地圖

餅狀圖:不同島嶼上每種達(dá)爾文雀糞便樣本的數(shù)量;系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)狀圖:目標(biāo)達(dá)爾文雀的進(jìn)化關(guān)系。

研究結(jié)果

?達(dá)爾文雀的核心腸道微生物為厚壁菌門(Firmicutes )、變形菌門(Proteobacteria)和放線菌門(Actinobacteria)

研究發(fā)現(xiàn),3種核心腸道微生物:厚壁菌、變形菌和放線菌(門水平)分別占總豐度的50%、40%和8%,與其他熱帶地區(qū)鳥類的腸道微生物(門水平)結(jié)構(gòu)一致。腸桿菌屬(Enterobacter)和腸球菌屬(Enterococcus)分布于所有樣本,志賀氏桿菌(Shigella)僅出現(xiàn)于Darwin?島的達(dá)爾文雀(圖2)。

圖2.?達(dá)爾文雀的腸道微生物群落結(jié)構(gòu)

橫坐標(biāo):紅色表示旱季;藍(lán)色表示雨季。每個(gè)樣品平均2.5W條reads,組成297個(gè)OUT(97%相似度聚類),截取每個(gè)樣品前1%的物種豐度。

表1.?達(dá)爾文雀的樣本大小、食性分類以及α多樣性

●?嗜血達(dá)爾文雀(Geospiza septentrionalis)具有獨(dú)特的腸道微生物結(jié)構(gòu)

嗜血達(dá)爾文雀:以鰹鳥(一種熱帶海鳥)血液和卵為食,而鰹鳥以魚類為食,因此嗜血達(dá)爾文雀與海洋肉食動(dòng)物δ15N結(jié)果相似,而其他島上的達(dá)爾文雀以種子和昆蟲為主。δ15N結(jié)果顯示:嗜血達(dá)爾文雀與G. fortisG.fuliginosa食性差異顯著(p<0.0001),但與海洋食肉動(dòng)物(北極熊、海獅)更近(圖. 3A)。NMDS結(jié)果顯示:嗜血達(dá)爾文雀腸道微生物結(jié)構(gòu)明顯區(qū)別于G.fortis和G.?fuliginosa(圖. 3B)。

圖3. A:同位素δ15N?和?δ13C研究wolf與San Cristóba島上嗜血達(dá)爾文雀(Geospizaseptentrionalis)、小地雀(G. fortis)和中地雀(G.fuliginosa)食性,3者分別以紅三角、綠方形和綠圓形表示,其他動(dòng)物(人類、狐貍和海鷗等)以灰圓形表示(來(lái)源于公開(kāi)數(shù)據(jù));B:基于OUT的非度量多維尺度(NMDS)。不同食性(嗜血、食種子)的3種達(dá)爾文雀腸道微生物β多樣性。

●?季節(jié)變化(旱、雨季)顯著影響達(dá)爾文雀腸道微生物結(jié)構(gòu)

圖4. NMDS:達(dá)爾文雀種類(A)、攝食習(xí)性(B)、島嶼(C)以及旱、雨季度(D)對(duì)達(dá)爾文雀腸道微生物的影響。(基于97%相似度OUT聚類,橢圓置信度90%)

圖5.?聚類熱圖:不同季度(旱、雨)和不同種類(12種)的達(dá)爾文雀腸道微生物結(jié)構(gòu)。

橫坐標(biāo):紅色為旱季,藍(lán)色為雨季。

?總 結(jié)

除嗜血達(dá)爾文雀(Geospiza septentrionalis),其他達(dá)爾文雀腸道微生物結(jié)構(gòu)差異較小,前者具有FusobacteriumCetobacterium等6種食肉鳥類或爬行動(dòng)物特有腸道微生物。通過(guò)δ15N同位素標(biāo)記,發(fā)現(xiàn)嗜血達(dá)爾文雀與海洋食肉動(dòng)物的食性相似。季節(jié)變化對(duì)達(dá)爾文雀腸道微生物的影響較大。

 

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