板栗是世界上重要的生態(tài)經(jīng)濟兼用樹種。作為干果類樹種,其栽培品種多由實生選育得到,品種間遺傳差異極大,單個品種的基因組很難代表主栽品種的遺傳特性。典型模式植物的基因組數(shù)據(jù)庫很難直接應(yīng)用到經(jīng)濟林干果類樹種的遺傳研究上。因此,通過泛基因組分析,構(gòu)建經(jīng)濟林樹種自己的基因組數(shù)據(jù)庫,對于揭示各個品種特異性狀的遺傳基礎(chǔ)意義重大。
近日,北京市農(nóng)林科學(xué)院林業(yè)果樹研究所蘭彥平團隊在《Frontiers In Plant Science》在線發(fā)表了題為“Pan-genome analysis of three main Chinese chestnut varieties”的研究論文。百邁客有幸為該研究提供板栗基因組測序組裝工作。
該研究以林果所自主選育的特色板栗良種 ‘燕紅’?(YH,易修剪品種)、‘燕山早生’(ZS,早熟品種) 和‘黑山寨7號’(H7,耐旱品種)為試驗材料,基于納米孔測序技術(shù)(Nanopore)、Illumina HiSeq X和Hi-C技術(shù),獲得了三個高質(zhì)量染色體水平的板栗基因組。通過同源基因鑒定和基因家族聚類分析,發(fā)現(xiàn)H7、YH和ZS分別有159、131和91個特有的基因家族。通過全基因組比對分析,尋找三個樣本基因組間的存在/缺失變異(PAV)信息,發(fā)現(xiàn)H7、YH和ZS中分別存在2364、2232和1475個特有基因(見圖1)。

圖1 三個板栗品種基因組Hi-C熱圖、基因家族聚類及基因PAV信息
糯性是板栗最重要的食用品質(zhì)之一。然而,關(guān)于板栗中糯性基因報道卻很少。通過與近緣種比對,發(fā)現(xiàn)板栗中與糯性相關(guān)的基因家族GBSS II存在擴張。為了進一步探索該家族進化趨勢,本研究針對所有GBSS蛋白和相關(guān)家族成員進行了系統(tǒng)的發(fā)育分析。研究表明板栗中的GBSS II-b分支比近源物種多個成員。

圖2 板栗GBSS II基因家族進化樹分析
此外,依托國家林草局板栗工程中心,構(gòu)建了板栗基因組數(shù)據(jù)庫(圖三),為瀏覽基因組(JBrowse)、搜索序列(BLAST)和設(shè)計引物提供了工具。

圖3 板栗基因組數(shù)據(jù)庫
本研究通過第三代基因組測序技術(shù)及泛基因組分析,發(fā)現(xiàn)了各主栽品種基因組間的顯著差異及特有基因,并部分解釋了板栗糯性風(fēng)味的遺傳基礎(chǔ),為實現(xiàn)早熟、抗旱及宜機械化修剪的優(yōu)質(zhì)板栗品種的聚合育種打下基礎(chǔ)。該論文由北京市農(nóng)林科學(xué)院林業(yè)果樹研究所完成,胡廣隆副研究員為第一作者,蘭彥平研究員為本文通訊作者,得到國家重點研發(fā)計劃和院科技創(chuàng)新能力建設(shè)專項基金資助。
泛基因組研究在各研究領(lǐng)域已大放異彩
截至目前,泛基因組已在植物、真菌、細菌、動物領(lǐng)域中得到廣泛研究。泛基因組分析有助于理解物種的特征,同時泛基因組圖譜提供的基因PAV變異或基因復(fù)制等復(fù)雜基因組變異,有助于解析動植物表型和性狀的多樣性,為物種的遺傳改良提供寶貴的遺傳資源。
通常泛基因組研究除了構(gòu)建pan-genome,會進行核心基因(core gene)、非核心基因(dispensable gene)以及特有基因(Private)來研究物種相關(guān)農(nóng)藝性狀與功能基因。而結(jié)構(gòu)變異是泛基因組的重點研究對象,通過PAV(存在與缺失變異)、倒位、易位、拷貝數(shù)變異等結(jié)構(gòu)變異信息尋找引起不同品系間差異性狀的關(guān)鍵變異位點。除此之外,泛基因組還可以結(jié)合三維表觀調(diào)控、群體遺傳進化、全基因組關(guān)聯(lián)分析、轉(zhuǎn)錄共表達、差異代謝物以及數(shù)據(jù)庫構(gòu)建存儲等方式進行深入的數(shù)據(jù)挖掘。
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