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 分類: 基因組測(cè)序

植物核酸的提取和純化是分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)技術(shù),獲得高質(zhì)量的核酸是進(jìn)行后期深入研究其各項(xiàng)性能指標(biāo)及應(yīng)用的前提。為使所得核酸純度高、結(jié)構(gòu)完整性好,在植物樣品制備和提取過(guò)程中應(yīng)根據(jù)不同的研究需要,采取不同的措施,盡量排除其他大分子成分(如多糖、蛋白質(zhì)等)的干擾。本期,和大家共同分享一下植物樣品制備方面的知識(shí),以期能夠?qū)Υ蠹业目蒲杏兴鶐椭?/p>

被子植物6大器官模式圖

1.在與研究目的不沖突的前提下,盡量選取新鮮、幼嫩、生長(zhǎng)狀態(tài)良好的組織部位。植物組織越幼嫩新鮮所含的次生代謝產(chǎn)物就越少,隨著植物組織的逐漸成熟,次生代謝產(chǎn)物的含量會(huì)逐漸增多,而次生代謝產(chǎn)物的存在會(huì)影響核酸的提取效果,次生代謝產(chǎn)物越多,核酸提取越困難,得率也越低。

2.如果植物組織表面污漬較多,在采集之前應(yīng)迅速用預(yù)冷的純凈水或75%乙醇擦拭或沖洗干凈,再用吸水紙吸干組織表面殘留液體。

3.將處理好的組織樣本混合均勻后保存于2 mL或更大體積的旋蓋凍存管中或者用準(zhǔn)備好的錫箔紙包裹組織。

4.迅速置于液氮中冷凍1h以上,然后轉(zhuǎn)移至-80℃長(zhǎng)期保存,干冰運(yùn)輸。

植物組織制備注意事項(xiàng)

1.勿用TRIZol直接浸泡植物組織,也不要使用RNAlater等保護(hù)液保存植物組織,因植物組織含細(xì)胞壁及次生壁,保護(hù)液不易滲透進(jìn)組織內(nèi)部,達(dá)不到保護(hù)效果。

2.不建議將植物組織磨成粉末寄送,盡量送完整的組織,因粉末狀態(tài)的樣品更易降解。

3.果實(shí)類樣品核酸提取得率低,為提高核酸的產(chǎn)量,需要加大送樣量,一般為普通組織送樣量的3倍以上。

植物組織制備常見問(wèn)題匯總

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